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实验四 目的片段和载体的连接
【实验目的】
通过本实验掌握DNA重组连接方法。
【实验原理】
外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这种重新组合的DNA叫做重组子。DNA重组本质是一个酶促反应过程，一般的连接反应都是在T4连接酶的作用下，有Mg 2+、ATP存在的连接缓冲液系统中，将目的片段与载体进行连接。
【实验步骤】
1. 在灭菌的200μL EP 管中，加入：
PCR产物 4.5μL
pMD19-Vector 0.5μL
Solution I 5 μL
共10μL体系。
阴性对照实验：将以上体系中的PCR产物换成ddH2O。
阳性对照试验：将以上体系中的PCR产物换成Control Insert
2. 盖好盖子，用手指轻弹EP管数次，并于台式离心机离心 2 sec以集中溶液。
3. 将反应管放入16℃连接30min。
【结果与分析】
实验结果会在后续的实验中得以体现
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