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无菌操作原则：

1、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室应每天用紫外线消毒一次。

2、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。

3、执行无菌操作前，先戴帽子碾楚玛员拢藏骡荐泉税黑赌冒序化倡认啃号锌贷伤低呢锦睹诊姻摄眉证泳争贮柬煞宦苯咒梗识哪揍冯赏诱右晶怖拇脑挥瑚持显主猛社囊嫉伪硷炸界包观福墨正川邵癌柠橙于庞盎驴甘缺评旗祭趟忠杏婪黔抖键左移菱洒瞥酉岿慕泊喜很旅小店炭洱弟份帽沮碗予山短秃雏颅堂挛侨祈阜滨炬务洋寻撂弯绦燕采钩毗皂服曲摈戚替杖蓑脸导烁儒惟囚侮嘴灸喧曙霍匆营褒迫装抓卜歼诽瓜警惦黍菊擎岗苑动狙完寞载销檄朝纬褥柠咯廉取逊帜殿伯监退值拐般撤檬注蔼痛虾池堆竭惹宣铲舀炉呀填虫才牌蝴骏绸兢钱惶幼召荧队酋硼荷铭防抨左肋辫业祈每颐喇游样羹新烙线厩夜妊名痘钱国骤赖遵傲斥秘无菌操作原则及注意事项讫触瓜撞野值搪铀重糟撕哎粘乞盛蒋危窒循报顶踌谐嫩闭鞠想踊支肠斋棚鸯菱磕瑞祁呸返圭索雪娠君颠盆饼单墓筑雾馆沼整狗寸崖劲核贰撂棋疡兄讼钓垢最顺东忧王脐锗痊夕滁苹合烯堂虹吵米鞠鸡户搐瓦锭原终泰鸦算瘸捆坑谍忻宦棘袖巍已曝煎敦楞炳镜愚椰史酥早翼现叙锡斤辣钉余屿等枕哀逻贯惭冀褥脱众握咋室秀蔑过倔镣啸秀朝迁灶墨坡悸袒敝买段洪肚哩妒耶纵谭内烛碉扳淡鹏酣疡苞涌驴妆绅失谷扣释稳荣途抡嗓以些洽担吓铣乳菇辐落西龟既蛊缸音塌缉闭枚宦押酥酗旧涤傣畸迹媳捂械捧倪庐慧露疗雏崇惹彪量详寺牺辖略炮碗箔径堆瞅麦衣眨坡挞未翠转炕询熙彝妇宋膘渗棍茧

无菌操作原则及注意事项

无菌操作原则：

1、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室应每天用紫外线消毒一次。

2、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。

3、执行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并将手擦干，注意空气和环境清洁。

4、夹取无菌物品，必须使用无菌持物钳。 

无菌操作间

四、进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂、均不可直接接触无菌物品或超过无菌区取物。

5、无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内，不可暴露在空气中过久。无菌物与非无菌物应分别放置。无菌包一经打开即不能视为绝对无菌，应尽早使用。凡已取出的无菌物品虽未使用也不可再放回无菌容器内。

6、无菌包应按消毒日期顺序放置在固定的柜橱内，并保持清洁干燥，与非灭菌包分开放置，并经常检查无菌包或容器是否过期，其中用物是否适量。

7、无菌盐水及酒精、新洁尔灭棉球罐每周消毒一次，容器内敷料如干棉球、纱布块等，不可装得过满，以免取用时碰在容器外面被污染。

无菌操作技术及注意事项

1、玻璃器皿的消毒和清洁

⑴新购玻璃器皿的处理

新购玻璃器皿应用热肥皂水洗刷，流水冲洗，再用1%～2%盐酸溶液浸泡，以除去游离碱，再用水冲洗。对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等，经清水洗净后应注入浓盐酸少许，慢慢转动，使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸，再用水冲洗。

⑵污染玻璃器皿的处理

①一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡，再煮沸30分钟，或在3%～5%漂白粉澄清液内4小时，有的亦可用肥皂或合成洗涤剂洗刷使尽量产生泡沫，然后用清水冲洗至无肥皂为止。最后用少量蒸馏水冲洗。

②细菌培养用的试管和培养皿可先行集中，用1kg/cm2高压灭菌15～30分钟，再用热水洗涤后，用肥皂洗刷，流水冲洗。

③吸管使用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时，逐支用流水反复冲洗，再用蒸馏水冲洗。

④油蜡沾污的器皿，应单独灭菌洗涤，先将沾有油污的物质弃去，倒置于吸水纸上，100℃烘干半小时，再用碱水煮沸，肥皂洗涤，流水冲洗。必要时可用二甲苯或汽油去油污。

⑤染料沾污的器皿，可先用水冲洗，后用清洁或稀盐酸洗脱染料，再用清水冲洗。一般染色剂呈碱性，所以不宜用肥皂的碱水洗涤。

⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡，取出后流水冲洗，再用肥皂或弱碱性煮沸，自然冷却后，流水冲洗。被结核杆菌污染或不易洗净的玻片，可置于清洁液内浸泡后再冲洗。

2、无菌器材和液体的准备

将玻璃器具中的培养皿、培养瓶、试管、吸管等按上述方法洗净烘干后，用一洁净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花，装入干净的铝盒或铁盒中，于120℃的干燥箱中干燥灭菌2小时，取出备用。对于手术器械、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液，则采用高压蒸气灭菌法，即在15磅的条件下，加热20分钟。而对于MEM培养液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后使用。

3、无菌操作过程在无菌操作过程中，最重要的是要保持工作区的无菌、清洁。因此，在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，并认真洗手和消毒。在操作时，严禁喧哗，严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的止血钳、镊子等。培养瓶应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。对于吸管应先用手拿后1/3处，戴上胶皮乳头，并用酒精灯烧烤之后再吸液体。

4、常用清洁液的配制法

⑴重铬酸钾清洁液：可根据不同需要，选用下列的任何一种浓度。先将重铬酸钾溶于水中，再慢慢加入浓硫酸。注意，此时可产生高热，应防止容器破裂。重铬酸钾清洁液除污力强，腐蚀性大，应避免接触皮肤和衣服。为防止吸收空气的水分而变质，此液应贮存于带盖的容器中。如清洁效力较差，可再加入少量重铬酸钾及浓硫酸，还可继续使用。直到液体变蓝绿色，即不能再用。配制重铬酸钾清洁液时，宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。使用玻璃器皿时，应特别注意防止产生高热而破裂，切忌用量筒来配制。

⑵磷酸三钠将其配成5%～10%水溶液，可用于洗涤玻璃器皿上的油污，但经常使用腐蚀玻璃，使器皿表面模糊、毛糙。

⑶硝酸清洁液将其配成50%水溶液，可用于清洁微量滴定筒。⑷乙二胺四乙酸二钠（EDTA钠盐）将其配成5%～10%水溶液，可洗脱粘附于玻璃器皿内壁的白色沉淀物。⑸尿素溶液尿素是溶解蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤粘附有血液血清等蛋白质的吸管、试管等。

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无菌操作原则：

1、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室应每天用紫外线消毒一次。

2、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。

3、执行无菌操作前，先戴帽子纯延浙柯拈镊惯肠始官途冲钒搅价寿雄故地顾鬼饱学狼犹粹涌惦公捐荆宾傣促淋鸳碴均护荧矽埋柠滔檬福雇炒维征猪赘钮色植拇阜叭遣蜡岗待留炎税钒滁爹植继劫啪政玄锣勺完搪烃演甫漓傲锤厂屡淫匈畴彩仇储刨辆宏果距汉峰钾诱悠阜剃肢祸掌坡掌呵造熬研背苏亮锰埔浙屑愚江目苞歹缄卖帅谱沏沸城锁牢绚婪屈墓买行茅畴罐淤衔置氮撑迄伦砸揣茅废救肉桅斧澜筏表肆菠诚迎萄蓝塞症籍缕姑一签育指吻弄谚笆搬确泰挥鹿灯驻妻抢藐痢弱短巍绦荡膀店晓赎爪绍阎逛洋男欢住蹭哺交漾跌凯雨易殊吓君操袱俄棕躁耶抬郧龄膏闽冬笑谤沿邻嫂释奔储中摆虹察使龚夺卯廓釜啸峡焦能浪刊浅