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注意:1.准备好70℃水浴锅。
2.所有的离心操作都在室温下(15-25℃)14000/分钟
3.BufferALInhibitEXBuffer溶解任何沉淀都要加热和混匀。
AW1BufferAW2都加乙醇。
5.使用之前混合所有缓冲液。
1.称取200ul样品在2ml的离心管中,离心管放在冰上。
2.每个样品添加1mlInhibitEXBuffer,然后持续旋涡混合1min或者直到样品混合均匀。
3.70℃加热悬浮液5min(难以溶解的细胞溶解温度可以提高到95℃),然后旋涡混合15s
4.离心样品1min析出沉淀。
5.另取离心管加15ulProteinaseK
6.移取200ul步骤4的上清液至含ProteinaseK的离心管中。
7.然后添加200ulBufferAL,旋涡混合15s(注意:不要直接添加ProteinaseKBufferAL中,样品和BufferAL必须充分混合成均匀混合液)


8.70℃孵育10min
9.添加200ul乙醇到溶解液中,旋涡混合。
10.小心移取600ul步骤9的裂解液到QIAamp旋转柱中,盖上盖子,离心1minQIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉含有滤液的管。
11.小心打开QIAamp旋转柱,添加500ulBufferAW1离心1minQIAamp旋转柱放到一个新的2ml收集管中,丢掉包含滤液的收集管。
12.小心打开QIAamp旋转柱,添加500ulBufferAW2离心3min丢掉包含滤液的收集管。
13.QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉旧的含有滤液的收集管,离心3min
14.QIAamp旋转柱放到一个新的的离心管,直接移取200ulBufferATEQIAamp薄膜上。室温孵育1min然后离心1min洗提DNA通过UV吸收度判断DNA纯度,使用BufferATE做空白设计避免结果错误。

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