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282・ 塞验 捡验医学2015年6月第33卷第3期Exoerment aId Laborat0r Medine.Jun.2015.Vo133.No.3 实验研究・ 液基细胞涂片联合染色体检测在恶性胸水诊断中的应用 周建荣 ,吕军华2,刘四君s 1、赣南医学院第一附属医院呼吸科,江西赣州341000;2、赣南医学院形态学实验教学中心,江西赣州341000;3、赣南 医学院病理教研室,江西赣州3410001 摘要:目的探讨液基细胞检测联合染色体分析在恶性胸水中的诊断价值。方法218例胸水患者均留取胸水60 m1.同 时进行液基细胞检测和染色体分析,并与有组织病理学诊断结果的40例恶性胸水进行对照。结果…液基细胞和染色体 与组织病理学检测结果对照:恶性胸水确诊的共40例。其中单纯采用液基细胞检查诊断恶性胸水85%(34/40):单纯采用染 色体诊断恶性胸水92.5%(37/40)。(2)液基细胞及染色体串、并联试验在恶性胸水中的诊断评价:两者采用串联试验与并联试 验诊断恶性胸水的灵敏度分别为82.5%、95.O%;特异度为100%、98.3%;一致率为96.8%、97.7%;约登指数为82.5%、93.3%; Kappa值为88.5%、92-4%;阳性预测值为100%、92.7%;阴性预测值为96.2%、98.9%。结论液基细胞检测及染色体对诊断恶 性胸水具有重要的临床诊断价值.两者联合检测能提高恶性胸水的准确率 关键词:液基细胞:染色体:恶性胸水 中图分类号:R446.9。R596. 文献标识码:A 文章编号:1674—1129(2015)03—0282-03 DOI:10.3969 ̄.sn.1674-1 129.2015.03.0010 AppHcafon of ThinPrep cytologi test(TCT)combined th chromosome detecton n diagnosi of malgnant pleural ef ft ̄lOl ZHOU nrongI,LU JunhuJ,LIU Siju ̄.j.Department f Respiatory Medicine,Fi A ̄lated Hospial o Gannan Medi ca Colege;2.Morphology Expermental Teaching Center o Gannan Medial Colege;3.Deparment ofPaholog Gannan Medi co ,Ganzhou Jiangxi 341000,China. AbstraeU Objectve To explore he diagnost value fThinPrep cytologic est(rcr combined wih chromosome detecton n di agnosis of malignant pleura efusion.Methods Sixty ml pleura1 efusion were respectvely collected from 21 8 patients witl pleura ef- usion,and detected by TCT combined with chromosome detecton.40 cases of maigant pleural efusion diagosed by histopathology as he contol group.Resuls()Compared he esul of TCT and Chromosomes&histopathology es:40 cases malgant pleural efu— sion wer confmed.The ensiviy of detecon of malgnant pleur efuson only by TCT was 85%04/40)and 92-5%37/40)only by chromosome detecton.(2)The diagnosi evauaton of malgant plur efuson used by seres and paralel patern of both TCT and chromosome detection:the sensitiviy in diagnosis of malignant pleural efusion used by both seres and parallel pattern was 82.5%and 95.0%respectively;he specicity was 100.and 98-3%respectively;the coincidence rate was 96.8%and 97.7%respectivelthe Youden's index was 825%and 93.3%respectvelye Kappa value was 88.5%and 92.4%respectvelyhe positive predictve value was 100%and 92.7%respectively,and negative predictve value was 962%and 98.9%respectively.Conclusions TCT and chromosome detection in diagnosing maglignant pleura efusion have important clinical diagnostic vaue.The combination of TCT and chromosome detection can improve the accuracy rate of diagnosting maligant pleura effusion. Key word:ThinPrep cytologic test;Chromosome detection;Malignant pleural efusion 不明原因的胸水是至今困扰临床医师的难 1.1一般资料对218例不明原因的胸水患者均 题.如能尽早明确胸水性质。对治疗及预后至关重 要 收集2013年7月至2014年5月在我院以胸 水性质待查住院的患者218例 对其胸水进行了 液基细胞及染色体检测.同时与组织病理学对照. 进行了液基细胞学和细胞染色体分析.然后与组织 病理学f电子支气管镜检查、经皮肺穿刺或外科手 术取得结果1对照。恶性胸水有4O例,良性胸水有 178例。 探讨两者单独及联合检测对明确患者胸水性质的 临床价值 1资料与方法 基金项目:江西省赣州市指导性科技计划项目(编号:2013—6) 作者简介:周建荣女,出生于1972年8月,硕士学位,副主任医 1.2液基细胞检测留取患者胸水60m1.随机每次 取5~10ml,以3500dmin离心lOmin,去除上清液。 取沉积物约2ml,自动沉降、离心、制片,再放入自 动模管,加入固定液。进行巴氏染色.封片。细胞染 色体核型分析:同时抽取胸水60ml。采用直接制片 师,临床医学专业,主要研究方向为肺癌及恶性胸水。 法:离心,低渗,预固定,离心,再固定,制片,染色, 
实验与检验医学2015年6月第33卷第3期ExoetmentM and Laborator Medicine,Jun,2015,Vo133,No.3 ・283・ 在显微镜下观察细胞形态与染色体的变化.参照 南昌大学医学院第一附属医院细胞室肿瘤染色体 型核即3≤R<4.重度异型核即R≥4.核增大不明 显而着色极深。则其异型性上升一级。 1.3统计学方法采用SPSS14.0统计软件 液基细 诊断标准对异常染色体诊断f出现异常染色体则判 断胸水为恶性1:①排除人为染色体数目改变的前 胞检测、染色体的诊断价值用灵敏度、特异度、 Kappa值等表示,并对两种方法的联合(串联、并联1 提下,染色体数目异常:或②二倍体众数伴克隆性 高异倍体;或③见真性超四倍体;或④见标记染色 体;或⑤散在分布的间期细胞核呈重度异型性;或 ⑥间期细胞核呈腺样排列的中度异型性。同时显微 镜下观察间期细胞核.用病理显微图像分析仪测量 染色体标本上的间期细胞核核径,相对核径比㈣= 待测间期核横径/淋巴细胞核径 通常着色情况下. 核异型性分级如下:轻度异型核即2 ̄R<3,中度异 诊断价值进行评价。尸≤0.05为差异有统计学意 义。 2结果 2.1液基细胞和染色体与组织病理学检测结果对 恶性胸水确诊的共40例.其中单纯采用液基 细胞检查诊断恶性胸水85%(34/40):单纯采用染色 体诊断恶性胸水92.5%(37/40)。见表1。 表1液基细胞和染色体与组织病理学检测结果对照 2.2液基细胞及染色体串、并联试验在恶性胸水中 的诊断评价两者采用串联试验与并联试验诊断 82.5%、93-3%;Kappa值为88.5%、92.4%;约登指 数为82.5%、93-3%;阳性预测值为100%、92.7%; 恶性胸水的灵敏度分别为82.5%、95.0%;特异度为 100%、98.3%;一致率为96.8%、97.7%;约登指数为 阴性预测值为96.2%、98.9%。见表2。 表2液基细胞及染色体串、并联试验在恶性胸水中的诊断评价 串联试验可提高诊断恶性胸水的特异度和阳 性预测值.即出现阳性结果时患该病的可能性就 象提出的。恶性肿瘤多数有明显的染色体变异.这 在良性的疾病中是极罕见的 恶性胸水以超二倍 更大,即降低了误诊率,却增加了漏诊率。并联试 验可提高诊断恶性胸水的灵敏度和阴性预测值. 体为多,多数为非整倍体.并可出现染色体的结构 异常。如染色体移位、缺失、倒立、线状或环状等【砌。 现逐渐将染色体检测引进临床 我们将此两种方 却使特异度和阳性预测值下降.即并联试验使漏 诊率下降,却增加了假阳性率f误诊率1。 3讨论 法联合应用于鉴别不明原因的胸水.大大提高其 检出率和准确率。目前染色体检查方法各异.有短 20世纪9O年代末出现液基薄层细胞学检测 LCT)技术。起初多用于妇科细胞学标本【。其基本 流程是:(用涡轮震荡保留液并离心.留取有价值 的细胞集中于底部。f21混匀后的细胞自动移入至 期培养法和直接制片法.诊断良恶性胸水的标准 尚未完全统一【 。我们自2008年引进并参照南 昌大学医学院第一附属医院细胞室肿瘤染色体诊 断标准。国内学者[ 报道.染色体检查诊断恶性 胸水的特异性为90.9%~100.0%.敏感性为71.4% 88.9%。本研究发现,单用液基涂片法诊断恶性胸 水的灵敏度为92.5%.特异度为100%:单用染色体 法确诊恶性胸水的灵敏度为85%、特异度为 98.3%。两种方法联合,并联检测的灵敏度为95%. 沉降管.通过重力作用使细胞黏附在玻片上形成 薄层.自动完成染色。现在LCT技术临床应用越来 越广泛1。在胸水诊断的应用价值国内也有报道【 但联合细胞染色体诊断不明原因的胸水在国内 尚少有报道.且部分研究中没有与组织病理学对 照,结论尚未完全一致。肿瘤染色体理论是1941 年Boveri等首先针对恶性肿瘤细胞的一些特殊现 串联检测的特异度达100% 细胞染色体诊断恶性 胸水的灵敏度为60.7%、特异度为95%,联合液基 
284・ 实验与检验医学2015年6月第33卷第3期Exoementa1.nd Labor0rv Medicine un:   , : 细胞检测可提高诊断试验的特异度达10o%、阳性 used cytologic Preparatons in effusion immunocytochemistry[J] 预测值达100% LCT技术从根本上改变了传统涂 片的制作方法。与传统制片方法比较其优越性主 Diagn Cytopathol2002,26(1):61-66. 4]Fan YB,Wang Qs,Ye L,et a.Clinical applicaton of the SurePath quid-dased Pap test in cytologica screening of bronchi brush— 要表现在:f1)涂片质量大大提高,几乎保留了所采 集到的全部细胞,大大提高了阳性检出率。(21涂片 内细胞分布均匀.形态保存良好.核结构清晰可 辨。能最大限度地发现异常细胞.因而提高了筛查 阳性率和诊断的准确性 而常规细胞学检查是先 固定细胞.再染色或固定与染色同时进行.然后观 察完整细胞形态。这个形态学方法存在以下缺点: ng for the diagnosis of ung cancer[J】_Cytotechnology,2010,62(1): 53-59. 5】武春燕,王彦丽,陈岗,等.液基细胞学在肺癌支气管刷片检查中的 应用价值【J1.同济大学学报(医学版),2009,30(3):65—69. 【6】陈玉娟,王瑁.液基细胞学检测在肺癌诊断中的价值【JJ.医学综 述,201 1,17(17)2686—2688. 【7】周秋嫒,张惠箴,蒋智铭,等.胸腹水沉渣包埋切片中Napsin—A、 CK7、r几T一1等的表达及临床意义 2013,29(6):671—673. 【8】阮雅君,夏朝霞,方建晨.胸水常规及新柏氏液基制片在免疫细胞 化学染色中的应用【J].现在实用医学,2012,24(9):1055—1056. 9]周建荣,刘四君,曾小清.液基薄层细胞涂片法在恶性胸水中的应 临床与实验病理学杂志, 背景不清晰,有坏死、较多的红细胞、黏液等组织、 有核细胞太少影响观察。细胞遗传学方法则抓住 了细胞癌变的关键一核的改变一染色体畸变和核 形态学改变.可检出常规细胞学无法识别的细胞 核微小异常:高效富集了有核细胞,大大提高了癌 细胞的检出概率:低渗及酸性固定液处理彻底净 用【J1.赣南医学院学报,2014,34( ̄:931. [10]Carpagnano GE,Costantno E,Paladino GP,et a1Mierosatellie a eratons and ceU—fee DNA analysis:could they increase the cytol— 化了标本背景:低渗及固后完好保存了细胞核形 态,放大了癌细胞核与正常细胞核的形态学差异. ogy sensiivity in the diagnosis of maignant pleural efusion[J].Re— uvenaton Res,2012,15(3):265-273. 使之易于鉴别。这样无疑就提高了灵敏度.减少漏 诊率。可大大提高染色体的阳性检出率 因此通 [1 1]Rosolen DC,Kulikowski LD,Bottura G,et a1.Efcacy of wo fuo— rescence in siu hybridization rFISm probes fr diagnosing malg— nant pleural effusions[J]Lung Cancer,2013,80(3):284-288. [12]Waller K,Chaithongwongwathana S,Yamasmit W,et aChromoso— mal abnormaes among 246 fetuses wih pleural effusions detect— ed on prenatal ulrasound examinaton:actors associated wih an 过联合应用液基薄膜技术检测和细胞染色体分析 则能迅速、快捷鉴别胸水的性质,可最大限度避免 漏诊和误诊.为临床提供更有价值的信息.是一种 行之有效的胸水的筛查手段 参考文献 【1】陈建华,邹华英.液基细胞学离心沉淀涂片法与传统巴氏直接涂 ncreased risk of aneuploidy[J]Genet Med,2005,7(6)4l7—421. 【13]熊闽春,赵青,王钦坤,等.胸水染色体与腺苷脱氨酶联合检测对 良恶性胸水鉴别诊断价值的探讨[J】实验与检验医学,2014,32(5): 573-574. 片法应用于宫颈疾病筛查的比较J】.实验与检验医学,2010,28 【14】葛利丽.染色体检测恶性胸水的诊断价值闭.中国误诊学,20l1, 1 5):506—507. [2]Jing X,Li QK,Bedrossian U,et a1Morphologic and immunoeyto- chemical perormances of efusion cel blocks prepared using 3 23)5615—5616. [15】周建荣,刘四君,吕军华.血清及胸水CEA检测联合细胞染色体 分析在老年患者恶性胸水诊断中的应用J1_山东医药,2013,53 43)35-36. dierent methods[J].Am J Cln Pathol2013,139(2):177—182. [3]Fetsch PA,Simsir A,Brosky K,et aComparison of three commonly 收稿日期2014—12—01;修回1期2015—04—15) 上接第268页1 【13】张静,黄晨艳.553例产妇血清、乳汁、唾液中乙型肝炎病毒DNA Pac J Cancer Prev,2006,7(2)313-317. 15]Ortega R,Minier P.Co-infecton.HIV/HBV.The hepattis B vius s not transmied or acquired thrugh caual contact,kissing or 载量的检测及相关性研究咖.实用妇产科杂志,2012,28(4)294— 297. hugging[J].Sidaora,2005,2)22-24. 【14]Taylor VM,Tu SP,Woodal E,et a1.Hepatits B knowledge and practices among Chinese immigrants to the Unied States[J].Asian 收稿日期2015—02—13;修回日期2015—05—07) 

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