一种用高拷贝质粒载体制备BAC载体基本功能基因的新方法

崔红玉;王亚萍;徐明举;薛永志;石星明;兰德松;王云峰;童光志

【期刊名称】《安徽农业科学》

【年(卷),期】2008(036)023

【摘要】[目的]简便有效地解决BAC载体序列因单一拷贝数带来的制备以及下游亚克隆操作的困难.[方法]选择适当的单一酶切位点,将单拷贝BAC载体质粒序列全部插入高拷贝质粒pUC119载体的适当位点.[结果]BAC载体基本功能基因序列在新质粒pUC119-BAC中失去了单一拷贝数控制功能,以高拷贝形式进行复制,利用单一酶切,可将BAC载体基本功能基因序列完整切下来,自连后重新恢复严格的单拷贝控制功能.[结论]利用高拷贝pUC119-BAC质粒,实现了BAC载体的基本功能基因序列高拷贝的复制和扩增,可以方便地用于分子克隆化重组病毒转移载体的构建或BAC文库的构建.

【总页数】4页(9890-9892,9950)

【关键词】细菌人工染色体(BAC);高拷贝质粒;BAC载体;单拷贝质粒

【作者】崔红玉;王亚萍;徐明举;薛永志;石星明;兰德松;王云峰;童光志

【作者单位】河北北方学院动物科技学院动物医学系,河北张家口,075131;河北省张家口市宣化区动物检疫站,河北张家口,075100;河北北方学院动物科技学院动物医学系,河北张家口,075131;河北北方学院动物科技学院动物医学系,河北张家口,075131;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001

【正文语种】中文

【中图分类】Q782

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1.一种用高拷贝质粒载体制备BAC载体基本功能基因的新方法 [J], 崔红玉; 王亚萍; 徐明举; 薛永志; 石星明; 兰德松; 王云峰; 童光志