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一种鱼油中EPA和DHA富集的新方法唐君;张春枝;吴文忠【摘要】研究了使用乙腈萃取鱼油镁盐的方法,并讨论了溶剂量、温度等因素对富集鱼油中DHA和EPA的影响.结果显示,使用乙腈萃取鱼油富集后,EPA、DHA的质量分数可达到72%.【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷,期】2008(027002【总页数】3页(P102-104【关键词】廿碳五烯酸(EPA;廿碳六烯酸(DHA;乙腈;萃取【作者】唐君;张春枝;吴文忠【作者单位】大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连医诺生物有限公司,辽宁,大连,116000【正文语种】中文【中图分类】TS225.240引言鱼油中富含廿碳五烯酸(EPA、廿二碳六烯酸(DHA。1978年，Dyerberg博士[1]通过实验证明鱼油中的这两种多不饱和脂肪酸可有效防止心血管疾病。时至今日，鱼油制品已成为重要的保健品之一[2]。为了得到多不饱和脂肪酸浓度较高的各种
浓缩产品，人们采用了低温结晶、金属盐沉淀法、超临界萃取、尿素包络、制备型高效液相色谱、分子蒸馏、银离子络合、酶法等方法,最为常用的是金属盐沉淀法。传统的金属盐沉淀法是利用饱和脂肪酸盐在有机溶剂中溶解度小[3]的特点来进行分离，多采用钠盐或者锂盐丙酮法。此法操作简单，大多数工序在常温下完成，无需使用大量的有机溶剂，选择性强，成本低，但是其沉淀时的温度相对较低，一般在-10℃以下，而且浓缩产品的浓度并不是很高。本文对金属盐沉淀法加以优化,得到鱼油镁盐代替传统的鱼油钠盐或锂盐。由于饱和脂肪酸镁盐在有机溶剂中的溶解度更小，这样能提高富集DHA和EPA的能力。1材料和方法1.1材料和试剂粗鱼油；甲醇、乙醇、氢氧化钠、氯化镁、二氯甲烷、氯仿、乙腈、丙酮、三氟化硼乙醚络合物甲醇溶液(14%、盐酸，均为分析纯。1.2产品测定方法DHA、EPA含量测定采用气相色谱法[4]：取油样150mg放入50mL容量瓶中，加入4mL0.5mol/L的NaOH甲醇溶液，使溶液呈液相透明，置75℃水浴沸腾5min，油基本溶化，冷却后加入5mL14%三氟化硼-3甲醇溶液再沸腾2min，加入足够饱和盐水，上层有黄色液体，加1mL石油醚，振荡分离使甲酯转入醚层浮到容量瓶细颈处，取上层溶液进行分析。1.3实验1.3.1粗鱼油的皂化将粗鱼油150mL、水150mL、乙醇150mL加入三口烧瓶，称取22.9g氢氧化钠(过量30%，加入三口烧瓶，充氮气保护，避光，搅拌，水浴加热至50℃，反应3h。反应结束时，旋转蒸发，脱掉加入乙醇量70%乙醇。1.3.2复分解反应
将得到的鱼油钠盐用水稀释4倍，搅拌均匀，缓慢滴入20%的氯化镁溶液136mL，待氯化镁溶液完全加入后继续搅拌30min。用布氏漏斗过滤，得到的淡黄色固体即鱼油镁盐，将产品烘干。1.3.3溶剂萃取称取15g鱼油镁盐固体，放入三角烧瓶中，加入40mL有机溶剂，在室温下搅拌1h后，布氏漏斗过滤，蒸干滤液，得白色固体。1.3.4酸化向“1.3.3”中得到的白色固体加入10mL盐酸，20℃搅拌30min，得到EPA、DHA的浓缩产物。2结果与讨论2.1复分解条件的优化2.1.1鱼油钠盐稀释倍数的确定用量筒量取“1.3.1”皂化后产物10mL，分别加入1、2、3、4、5和6倍水稀释，搅拌均匀后，缓慢滴加20%的氯化镁溶液9mL，滴加结束后过滤。可以看到，当稀释倍数为1倍时，滴加氯化镁溶液后溶液马上变的黏稠，不会出现沉淀；稀释2～3倍时得到的沉淀颜色很黄；稀释至4倍时，沉淀颜色较好，略微发黄；继续稀释鱼油皂化物时，无法进一步改善。故选择稀释4倍为最佳稀释倍数。2.1.2氯化镁加入量的优化用量筒量取10mL鱼油皂化物，加入4倍水稀释，搅拌均匀后缓慢滴加7、9、14mL的20%氯化镁水溶液。结果发现，如果加入氯化镁与鱼油的摩尔比为2∶1时，反应过程中只有少量的白色沉淀，当氯化镁的摩尔数过量30%时可得到8.5g白色沉淀，为理论量的94%。当氯化镁过量大于30%时，反应产生的沉淀会呈现泡沫状。这是由于在“1.3.1”的皂化过程中加入了过量氢氧化钠，氯化镁先与过量的氢氧化钠反应，故而需要氯化镁过量30%。但是若氯化镁继续过量，过量的
氯化镁将影响鱼油镁盐的稳定性，生成其他物质。2.2萃取条件的优化2.2.1溶剂的选择由于利用饱和脂肪酸镁盐在有机溶剂中溶解度较低的特点，富集EPA和DHA的含量，其原理与金属盐法一致，故选用低温沉淀法常用的溶剂进行筛选。称取15g鱼油镁盐固体，放入三角烧瓶中，分别加入40mL二氯甲烷、丙酮、乙腈和氯仿溶液，在20℃搅拌1h后，布氏漏斗过滤，蒸干滤液，得白色固体。气相色谱检测，结果见表1。表1溶剂对DHA和EPA萃取效果的影响Tab.1EffectofsolventsonextractionofDHAandEPA萃取溶剂二氯甲烷丙酮乙腈氯仿w(EPA/%36.724.449.731.1w(DHA/%26.115.123.215.6w(EPA+DHA/%62.839.572.946.7由表1可见,多不饱和脂肪酸镁盐在乙腈中的溶解度最高，其次依次是二氯甲烷、氯仿和丙酮。笔者认为这与溶剂的极性有很大的关系,故选取乙腈作为萃取溶剂。使用乙腈浓缩鱼油可以得到EPA为23.2%、DHA为49.7%、总质量分数为72.9%的浓缩产品。用气相色谱分别检测乙腈萃取后鱼油滤渣和滤液中的DHA和EPA含量，结果见