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徒手切片夹持物的改进方法

时间：2023-10-28 02:15:31 下载该word文档

・６８・　生物学教学２０１２年（第卯卷）第４期　徒手切片夹持物的改进方法　朱　慧　马瑞君　（广东省潮州市韩山师范学院生物学系５２１０４１）　吴清韩　（甘肃省兰州市西北师范大学生命科学学院７３００７０）　陈立宣　（广东省潮州市绵德中学５２１４１０）　摘要笔者寻找到一种效果理想的徒手切片法夹持物材料——凤眼莲的叶柄，由于其独特的海绵状结构特点，可以有效克服传　统夹持物的缺陷，适合于各种类型的实验材料。　关键词徒手切片辅助材料夹持物凤眼莲　徒手切片法被广泛应用于生物学教学与生物科学　研究的实验中。在徒手切片过程中，大部分传统的辅　助材料一夹持物的使用效果均存在一定缺陷或不足，　通过摸索与实践，笔者寻找到一种理想的夹持物材料　——凤眼莲的叶柄。　１传统夹持物材料的缺陷　徒手切片成功的关键除了操作者的熟练技法外，　其夹持物材料的选择也极为重要，尤其对于那些难于　直接拿在手中进行切片的实验材料。例如，质地柔软　或体积较小的幼根、叶片、胚、卷须及花等。传统的徒　手切片夹持物材料，如胡萝Ｉ－与萝卜的贮藏根、土豆的　块茎、接骨木与向日葵的髓心、草本植物的嫩茎、硬厚　的叶片及泡沫塑料等辅助材料均在一定程度上存在不　足…１。例如，切片时执握夹持物的力度很难把握，力　度过大，容易使材料细胞受损变形，力度不够，材料夹　撑不稳固，切片无法进行，且这些辅助材料对刀锋的阻　力较大，往往妨碍切片的顺利进行以及难以保证切片　的完整性等。　２新夹持物材料凤眼莲的介绍　凤眼莲，属雨久花科，多年生浮水或湿生植物，俗　名水葫芦，目前已分布于华北、华东、华中、华南及西南　的ｌ９个省市。并已扩散到温带地区，如辽宁锦州、营　口一带均有分布【引。　由于风眼莲的叶柄内部结构呈海绵状，通气组织　极其发达，薄壁细胞丰富而机械组织甚少，细胞含水量　丰富，具有良好的压力弹性，以其为徒手切片的夹持　物，能够有效避免其他夹持物的缺点，保证实验的顺利　进行及所切材料的薄、平及完整性，并且风眼莲分布地　域广，生长期为全年，资源丰富，低廉易得，因此以其叶　柄作为夹持物的徒手切片法值得推广应用，适合中学　物，实际上是一类由多种核苷酸组成的混合物，彼此之　间仅有一个或数个核苷酸的差异。如若ＰＣＲ扩增引　物的核苷酸组成顺序是根据氨基酸顺序推演而来，就　需要合成简并引物。简并引物同样也可以用来检测一　个已知的基因家族中的新成员，或用来检测种间的同　源基因。　与大学的生物学实验教学及植物组织结构的研究。　３　以凤眼莲叶柄作为徒手切片夹持物的应用实例　取新鲜凤眼莲植物的叶柄，切取接近叶片基部较　圆细部分（即去除中下部膨大部分）作为夹持物材料，　将其叶柄纵切一缝，并将预先用蒸馏水浸湿的材料夹　于其中，左手大拇指和食指的第一关节指弯夹住带有　材料的凤眼莲叶柄，然后用手握住夹持物，拇指应略低　于食指，材料上端超出手指２—３ｍｍ，右手大拇指和食　指捏住刀片（蘸水，使之滑润）的右下角，刀口向内，并　与材料切面平行，持材料的左手保持稳定，刀口快速水　平拉切，用湿毛笔将切下的切片移入培养皿的蒸馏水　中备用。切片工作完成后，通过肉眼观察，挑选薄而平　的切片做成临时装片（可用ｌ％乙醇番红染料进行染　色）进行镜检与拍照，亦可通过固定、染色、脱水、透明　及封藏等步骤制作成永久装片保存　ｊ。采用以凤眼　莲叶柄作为夹持物的徒手切片法，可对不同种类的植　物和器官进行切片，例如菝葜的幼茎（图１）、三裂蟛蜞　菊的根、刺葵的花序轴、茶叶的中脉及其他各种草本与　木本材料，切片的整体效果表现理想。　以凤眼莲叶柄作为徒手切片法夹持物材料也是对　入侵植物资源的一种有效利用。　图１菝葜的幼茎结构　主要参考文献　［１］高震．１９８６．徒手切片夹持物的制备．生物学杂志，４（１）：４５　［２］李振宇，解焱．２００２．中国外来入侵种．北京：中国林业出版社，　１８８　［３］罗新嫒，周剑莉，张玮．２００９．两种快速石蜡切片法的效果比　较．河南职工医学院学报，２１（６）：６４１～６４２　

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