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安徽医科大学研究生细胞培养-

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细胞培养考试重点
一.名词解释
细胞培养:从生物体中取出细胞(组织,模拟体内生理环境,在无菌,适宜的温度和一定营养条件下,使之生存生长并维持其结构和功能的方法。
原代培养:一般是指细胞从组织中分离出来在体外生长至传代之前的细胞培养。这种培养通常是异质性,生长缓慢,但比较能代表原组织特性。缺点是在培养过程中会失去许多原组织的细胞。
传代细胞:适应在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代细胞。即原代细胞培养物生长到一定阶段,再分散成单个细胞悬液,按一定比例接种于新的培养容器内称之传代。传代细胞称之细胞系,可分为两类:有限细胞系和连续细胞系。传代形成的具有各自生物特性或标志的细胞系称之为细胞株。
细胞富集:当细胞分离纯化并不完全彻底,培养物中能达到以某种细胞为主(占绝大多数的程度。
细胞纯化:是指从原代培养前成分混杂的异质性细胞悬液中或者从培养物中获得单一类型细胞的过程。通过细胞分离和纯化得到细胞株或系。
饱和密度(Saturation density:在特殊培养条件下,每平方厘米(单层培养或每毫升细胞悬液内可达到的最大细胞数。
汇合(Confluent:指细胞增殖生长相互连接成片占据所有底物面积现象。
超汇合(Super confluent:单层细胞培养附在底物上生长,汇合后发展成多层状态。

传代(Passage也称再培养(Subculture:把一瓶培养细胞全部或分成几份再培养的过程。
单层细胞培养(Monolayer culture:培养细胞在底物上生长成单层的培养法,即二维培养方法。
代或世代(Generation:指细胞经过一次分裂完成后至下次分裂的过程。
底物(Substrate:指供细胞贴附生长的实质性支持面(如塑料和玻璃等。
二倍体(Diploid:指双倍数的染色体数或具有此数的细胞系。
二倍体细胞系或株(Diploid cell line or strain:具有二倍体染色体数的细胞系或株。
非整倍体(Aneuploid:细胞染色体数为非整倍数(人23n的核型
核型(Karyotype:一个细胞全部染色体的组成和所有特征。
合核体(Synkaryon:两个细胞融合后形成的单核杂种细胞。
活力(Viability:以100个细胞中存活细胞数表示。
接触抑制(Contact inhibition:指细胞相互接触后失去运动(移动的现象。
接种率(Plating efficiency:接种细胞培养时细胞能形成克隆的百分数;如每一克隆均来自单个细胞时,则与克隆形成率等同。
接种存活率(Seeding efficiency:接种一定量细胞后,在一定时间内,能贴附于底物上存活细胞的百分数。

近汇合或半汇合(Sub-confluent:细胞在底物上生长接近但尚未完全汇合的状态(可用而70%、80%或90%等表示
连续细胞系或永生性细胞系或株(Continuous cellline:具有在体外可反复传代无限增殖能力的细胞群。
密度抑制(Density inhibition:由于细胞密度过大,培养液营养耗尽、代谢产物过多和生存空间消失所引起细胞增殖的抑制现象。
克隆(Clone:指由从一个共同的祖先通过无性繁殖而来的、遗传上同一的细胞群或后裔; Clone也可作动词用,用于指细胞形成克隆细胞群的过程,即从群体中把单个细胞分离出来,通过增殖形成细胞群或后裔的过程;
群体密度(Population density:培养底物单位面积上单层细胞数量。
群体倍增时间(Population doubling time:细胞指数增长期时,细胞群倍增所需的时间。
细胞系(Cell line:原代培养物经首次传代成功后即成为细胞系。
细胞株(Cell strain:通过选择或克隆法,从原代培养物或细胞系所获的培养物。
组织工程:是应用生命科学和工程学的原则及方法,在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上,研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的生物替代物的一门新兴学科。
平衡盐溶液:简称盐溶液,集缓冲液的缓冲能力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体。兼具缓冲和调节溶液的酸碱度、维持渗透压、同时供给细胞生存所需的能量和无机离子成分的作用。

生长基质(growth substratum:培养器皿表面包被的一层能改善生长表面的特性,促进细胞粘附和贴壁的物质。
消毒(disinfection:杀死物体上病原微生物的方法。
灭菌(sterilization:杀灭物体上所有微生物的方法,包括病原微生物和非病原微生物、繁殖体和芽胞。
杂交瘤细胞:指肿瘤细胞与体细胞融合形成的杂交细胞,它既保留了肿瘤细胞无限增殖的能力,又具有参与融合的体细胞的一些特征
杂交瘤技术(也称单克隆抗体制备技术:是指建立杂交瘤细胞系的技术,通常指B淋巴细胞杂交瘤技术,即将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,以建立可以分泌单一性抗体的杂交瘤细胞系的技术。
单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb:指由一个B淋巴细胞克隆所产生的,只识别一种抗原决定簇的均质抗体。
细胞融合(cell fusion:是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜融合形成单个细胞的过程。
去分化:失去了体内多方面调节因素的压力,细胞随即转向“自由”生长状态。分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。这种现象被称为去分化或脱分化
干细胞:是指具有无限或较长期的自我更新能力、多种分化潜能和高度增殖能力的细胞。
二.问答题
1.试述细胞培养的定义及其意义。

答:(1定义:从生物体中取出细胞(组织,模拟体内生理环境,在无菌,适宜的温度和一定营养条件下,使之生存生长并维持其结构和功能的方法。
(2意义:1培养的组织器官或细胞,能再一定范围和程度上反映生命活动规律和机体功能特点。培养的细胞为生命科学和生物医学各种研究奠定了物质基础。如药物筛选,疗剂评价;新生物制品研发;研究病毒及其他微生物;发现新的传染因子,组织工程中的支撑技术等;2细胞培养技术已经成为商品化生物技术产品的核心;3细胞(组织培养,包括器官培养终归是离体培养,缺少生物整体的严密联系,不能代表整个机体。在进行医学生物实验过程及对结果的评估都必须考虑这些。
2.简述组织工程作为一种新兴学科具有以下优点及其应用条件。
答:(1优点:1能形成具有生命力的活体组织,对疾病损伤进行形态结构和功能的重建,并进一步达到永久性替代;2可以用最少量的组织细胞(甚至可用组织穿刺的方法获得,经体外培养扩增后,来修复大块的组织缺损,完成无损伤性组织结构和功能的重建;3可按组织、器官缺损情况任意塑型,达到完美的形态修复。
(2应用条件:1需要有受者机体所能接受的细胞或组织;2需要有支持细胞附着和生长的物质和材料(可取自受者,或人工合成物和陶瓷等;3需要有诱导、调控组织细胞生长增殖和分化调控物质,如生长因子、促血管生长因子等信号转导分子等;
3.简述血清的优缺点。
答:(1优点:①血清中含有基本的营养物质;②血清中含有激素与生长调节因子;③血清中含有促进细胞粘附和铺展的因子;④血清中含有结合蛋白;⑤血清中含有抗机械损害的非特异性保护物质;⑥血清中含有pH缓冲物质;⑦血清中含有蛋白酶抑制剂;

(2缺点:①血清中也存在不少有害于细胞生长和繁殖的物质,例如补体、免疫球蛋白和一些生长抑制因子等;②血清的成分不明确,影响对结果的分析;③对多数动物细胞来讲,血清并不是细胞在体时直接接触的生理性液体,只有在伤口愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态;④血清也具有潜在的细胞毒作用