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微生物检验的基本操作技术分析
微生物检验是对于部分产品(只要是人类食用或直接接触使用的产品)进行细菌污染的定性或定量检验,并对于产品中的微生物种类、数量、性质及其对于人类产生的影响等进行检验,又被称为卫生检验。微生物检验主要负责具体样品的微生物检验工作;检验数据统计、整理、分析并出具检验报告;微生物检验实验室的日常管理和检验设备的维护工作;负责洁净车间的环境监控。微生物是以微型原生生物为主的生物群,微生物与人类之间关系密切。同时,微生物还包括有益和有害两类微生物。
微生物检验是产品检测中不可缺少的一部分。其一,微生物检验工作决定了产品的卫生质量,是产品安全检验中的重要环节,微生物检验通过检验产品中微生物的分布及含量,能够有效地展现产品的安全程度;其二,通过微生物检验,可以使相关人员正确地了解产品的污染卫生程度,保证产品的卫生安全水平,有效地防治由于微生物中毒造成社会公共安全卫生事件;此外,进行微生物检验工作必须坚持“预防为主”的工作方针,有效减少或杜绝微生物中毒事件的发生,有效地保障人们的身体健康安全;其三,微生物检验可以有效地促进产品质量,确保产品安全。
首先,微生物检验需要遵循无菌操作原则。无菌操作是微生物检验中的首要原则,无菌操作是保证微生物检验准确性的重要前提,在微生物检测过程中,检验人员需要防止其他微生物对于人体造成侵害,同时,还要保证在无菌区或不受污染的区域进行微生物检验,是保证微生物检验准确性和顺利完成的重要技术。微生物检验无菌操作技术主要包括两方面:一方面,创造无菌的微生物培养环境。包括提供密闭的微生物培养容器、微生物培养容器的灭菌、培养基的灭菌等;另一方面在操作和培养微生物过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。为了保证微生物检验的无菌操作,1.微生物检验时不应有较大或较快的运动;2.璃器皿要轻拿轻放;3.如果使用火焰,不宜在正火焰以上操作;4.接种设备应在
使用前后使用,必须通过燃烧消毒;5.接种培养物时,配合要轻巧准确;6.吸管不宜用嘴直接吸、吹;7.装有菌液的吸管、载玻片等设备应放入来苏尔溶液消毒桶内消毒。

其次,是微生物检验中的微生物接种、分离纯化及培养技术。微生物检验中的微生物接种是将微生物接到适合其生长的培养物中的过程。微生物检验常见接种方法有划线接种法、涂布接种法,液体接种法、穿刺接种法等。微生物的培养需根据待检菌的类型选择不同的培养方法,其生长情况受多种因素的影响,比如温度、湿度、氧气等等,因此,常用的培养方法有需氧培养法、厌氧培养法、二氧化碳培养法等。需氧培养法是实验室最常用的培养方法,此方法无特殊要求,只需将接种好的培养基放入普通培养皿中培养即可;厌氧培养法要求培养过程在无氧环境中进行,培养方法根据培养容器不同而分为厌氧罐法、厌氧气袋法、厌氧手套箱法等等,厌氧气袋法因不需要另外购买特殊仪器设备而备受基层实验室青睐;二氧化碳培养法是在培养的过程中需要百分之五到百分之十的二氧化碳气体,目前有专门的二氧化碳培养皿,可以调节二氧化碳浓度,使用方便,基层微生物检验实验室如不具备购买此设备的条件,也可以使用简单、经济的烛缸法、化学法等进行微生物培养。


再者,是微生物检验中的微生物常规鉴定技术。微生物常规鉴定技术包括对于微生物菌落形态、特性、镜检和生化鉴定等进行检验。微生物检验中的形态结构和培养特性主要是观察微生物菌落的形态、大小、颜色等是否光滑,微生物菌落是处于湿润还是干燥状态,微生物菌落有无蔓延生长,并观察微生物菌落液体培养基的浑浊度、半固体培养基观察是否有运动等。染色镜检主要是观察细菌的形态,是球菌还是杆菌,是革兰阳性菌还是革兰阴性菌。微生物生化鉴定技术主要是通过某些生物化学试验进行的微生物鉴定技术,比如糖类、醇类的发酵试验,靛基质试验,氧化酶试验等。现如今有针对某类细菌的成套生化鉴定试剂盒商品上市,简化了实验室鉴定流程,全自动细菌生化鉴定仪的问世,也使得微生物检验工作变得更加方便快捷。
最后是微生物保存。微生物保存的基本原理是在选择人为地创造适合微生物休眠的环境,使微生物经过后仍能保持细菌原有的优良特性。长期保存。基本措施是低温、真空和干燥。最常见的微生物保存工作包括以下四种:1.定期移植法。将微生物在斜面培养基进行接种,在4-6℃的环境中对于微生物进行培养,以一定的时间间隔(3-6个月)用于移植和培养。一种短期细菌培养保存方法;2、液体石蜡法。在定期移植法的基础上,通过为微生物培养基上注入液体石蜡的方式,使液体石蜡将微生物覆盖,并将其置于低温干燥地保存;3、真空冷冻干燥法。指将保藏的菌体或孢子悬浮于保护剂中,预冻后在真空条件下使水升华,真空密封后保存的长期保存方法;4.-80℃低温冷冻法。将菌种悬浮在保护剂中,在-80℃冰箱中冷冻,是一种长期保存方法。

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