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OMEGA RNA提取步骤

时间:2015-01-15 18:53:58    下载该word文档

OMEGA RNA 提取试剂盒步骤

1、将研磨好的冷冻植物组织100mg加入到离心管中,加入500ul Buffer RCL(使用前已加入β-巯基乙醇)大力涡旋以使组织块状分散,均匀反应。

255孵育3min,室温下14,000×g离心5min

3、吸取上清液至gDNA过滤吸附住中,室温下14,000×g离心2min

4、丢弃gDNA过滤吸附柱,在收集管中加入等体积的BufferRCB,吹打混匀5-10

5、吸取步骤4中混合液的1/2HiBind RNA小吸附柱中,室温下10,000×g离心1min,倒掉收集管中的液体

6、将步骤4中剩余的混合液再次加入到HiBind RNA小吸附柱中,室温下10,000×g离心1min,倒掉收集管中的液体

7、加入400ul RWC Wash Buffer室温下10,000×g离心1min,扔掉收集管

8、将吸附柱放入新的2ml收集管中,加500ul RNA Wash Buffer,室温下10,000×g离心1min

9、重复步骤8,再次用500ul RNA Wash Buffer洗涤吸附柱,室温下10,000×g离心1min,倒掉收集管中液体,然后吸附柱空离,10,000×g离心2min,以使干燥

10RNA溶解:将吸附柱放入新1.5ml离心管中,加30-50ul DEPC水,室温孵育2min,10,000×g离心1min(注:如果提取的RNA含量30ug,必须再次加入适量DEPC水溶解)

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