聪明文档网

聪明文档网

最新最全的文档下载
当前位置: 首页> 羊小反刍兽疫抗体PPRAb酶联免疫分析ELISA

羊小反刍兽疫抗体PPRAb酶联免疫分析ELISA

时间:    下载该word文档
羊小反刍兽疫抗体(PPRAb酶联免疫分析(ELISA
试剂盒利用说明书
本试剂仅供研究利用目的:本试剂盒用于测定羊血清,血浆及相关液体样本中小反刍兽疫抗体(PPRAb
实验原理:
本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中羊小反刍兽疫抗体(PPRAb用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中小反刍兽疫抗体(PPRAb相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成份后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原体复合物,通过完全洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相较较,从而判定标本中羊小反刍兽疫抗体(PPRAb的存在与否。

试剂盒组成
试剂盒组成说明书封板膜密封袋酶标包被板阴性对照阳性对照酶标试剂样品稀释液显色剂A显色剂B终止液浓缩洗涤液

样本处置及要求
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。认真搜集48孔配置12片(4811×48×1×13ml×13ml×13ml×13ml×13ml×1
20ml×20倍)×1
96孔配置12片(9611×96×1×16ml×16ml×16ml×16ml×16ml×120ml×30倍)×1
保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存

上清,保留进程中如显现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应依照标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。认真搜集上清,保留进程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管搜集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。认真搜集上清,保留进程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参如实行。
4.细胞培育上清:检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。认真搜集上清。检测细胞内的成份时,用PBS()稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右2000-3000/分)。认真搜集上清。保留进程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入必然量的PBS。用液氮迅速冷冻保留备用。标本融化后仍然维持2-8℃的温度。加入必然量的PBS(),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。认真搜集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6.标本搜集后及早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。假设不能马上进行实验,可将标本放于-20℃保留,但应幸免反复冻融.
7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:别离在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽可能不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将3048T20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5.洗涤:警惕揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3

TOP热门搜索

  • 29.8

    ¥45 每天只需1.0元
    1个月 推荐
  • 9.9

    ¥15
    1天
  • 59.8

    ¥90
    3个月

选择支付方式

  • 微信付款
郑重提醒:支付后,系统自动为您完成注册

请使用微信扫码支付(元)

订单号:
支付后,系统自动为您完成注册
遇到问题请联系 在线客服

常用手机号:
用于找回密码
图片验证码:
看不清?点击更换
短信验证码:
新密码:
 
绑定后可用手机号登录
请不要关闭本页面,支付完成后请点击【支付完成】按钮
遇到问题请联系 在线客服