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广西陆川猪和巴马香猪的分子生物学研究进展
黄艳娜;兰干球;蒋钦杨
【摘要】陆川猪和巴马香猪均为产于广西被列入国家级地方品种遗传资源名录的具有优良性能的品种.近年来,深入开展地方品种猪的分子生物学基础研究已成为重点.作者现对广西陆川猪的遗传与繁殖、猪支原体肺炎病原分子致病机制,以及巴马香猪的遗传与繁殖、疾病模型方面的分子生物学研究作一综述.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷,期】2014(041011【总页数】6页(P79-84
【关键词】陆川猪;巴马香猪;分子生物学【作者】黄艳娜;兰干球;蒋钦杨
【作者单位】广西大学动物科学技术学院,广西南宁530004;广西大学动物科学技术学院,广西南宁530004;广西大学动物科学技术学院,广西南宁530004【正文语种】中文【中图分类】S828
广西地方品种猪有陆川猪、环江香猪、巴马香猪、桂中花猪、东山猪等，这些品种具有肉质优良、繁殖力高、抗病力强等特点，有着巨大的优势及发展前景。近年来，国内学者围绕广西主要地方品种猪不仅做了生产性能、生态适应性等方面的研究，而且利用现代分子生物学技术对其资源保护和开发利用也做了大量基础研究。作者现在对两大广西地方品种猪——陆川猪和巴马香猪的分子生物学研究进展作一综
述。
1.1陆川猪的优良特性陆川猪是中国八大地方优良猪种之一，原产于广西东南部的陆川县而得名，现主要分布于玉林、钦州、梧州等地。陆川猪历史悠久，早在1579年(明朝万历已卯年编纂的《陆川县志》中已有关于陆川猪的记载(陆川县志编辑委员会，1993。2000年，农业部第130号公告将陆川猪列入国家级畜禽资源保护名录，陆川县良种猪场被确定为国家级陆川猪品种资源保护场(谢栋光等，2003。2010年10月，在广西玉林市召开的中国名猪(陆川文化节及中国地方猪种保护与利用协作组第7次年会暨猪产业高峰论坛上，陆川猪喜获国家农业部颁发的“国家农产品地理标志”(李琼华，2010。
陆川猪体型特点为矮、短、宽、肥、圆，背腰宽广凹下，腹大常拖地、毛色呈一致性黑白花，并因其品质优良、繁殖力高、肉嫩味鲜、遗传力稳定等优点而广受消费者的喜爱(丘立天等，2007；孙俊丽等，2007；何若钢等，2008。其畜产品可加工为脆皮乳猪、白切猪脚、脆皮扣、无皮五花腊肉等，已经逐渐成为近年来宾宴上深受人们喜爱的菜肴。1.2陆川猪的分子生物学研究
1.2.1遗传与繁殖现代分子生物学技术飞速发展，已成为畜禽遗传育种与繁殖工作中不可缺少的重要手段。近年来，分子生物学技术加快广西陆川猪的遗传育种工作，开发其繁殖潜力，已取得了巨大的进展。张冰等(2007a以82头陆川纯种公猪作为研究对象，采用聚合酶链式反应―单链构象多态(polymerasechainreaction-singlestrandconformationpolymorphism，PCR-SSCP技术进行单核苷酸多态性(SNP检测，结果发现1个SNP位点，CC基因型个体的断奶重和平均日增重明显要高于TT基因型和CT基因型，瘦素(leptin基因3469位点多态性与陆川猪的断奶重和平均日增重呈显著相关，由此初步认为leptin基因可能是影响陆川猪生产性状的主要候选基因之一，可作为潜在的分子标记在今后的育种生产中得以应
用。同年，张冰等(2007b研究发现，陆川猪的产仔数与leptin基因3714位点的多态性显著关联，T3714GSNP可以作为陆川猪产仔数的遗传标记。Sun等(2009研究发现，瘦素受体(leptinreceptor，LEPR基因外显子2的155bp处发生了C→T的突变，使得苏氨酸变成了蛋氨酸，改变LEPR蛋白的表达量，甚至可能会改变蛋白质的空间结构，并发现LEPR基因外显子2基因型效应能够显著影响陆川猪头胎和头4胎平均的总产仔数和产活仔数。张冰(2007研究表明，胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1，IGF-1基因外显子3座位的基因型效应能够明显影响陆川猪的断奶重和平均日增重，胰岛素样生长因子-2(insulin-likegrowthfactor-2，IGF-2基因外显2座位的基因型效应显著影响陆川猪的初生重和平均日增重。张冰等(2009利用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism，PCR-RFLP分析技术和PCR-SSCP技术对82头陆川猪进行了3个与产仔数相关基因(雌激素受体(estrogenreceptor，ESR、促卵泡激素β亚基(follicle-stimulatinghormoneβ，FSHβ和催乳素受体(prolactinreceptor，PRLR的遗传多态性检测，结果发现，ESR基因的BB基因型占绝对优势；FSHβ基因只检测到了AA基因型；PRLR基因的AA基因型频率最高，AA基因型头胎、头4胎平均活产仔数和头4胎平均总产仔数分别比BB基因型多产1.42、1.43和1.02头。上述研究表明，leptin、LEPR、ESR、FSHβ、PRLR基因可能是影响广西陆川猪产仔性状潜在的遗传标记，IGF-1、IGF-2基因可能是影响猪生长性状潜在的遗传标记，可应用于今后猪育种工作中的重要标记辅助选择。
孙俊丽等(2010以17头陆川猪为试验对象，利用分子生物学技术检测线粒体DNA(mitochondrialDNA，mtDNA非编码区D-loop高变区序列，结果发现陆川猪有较高的遗传多样性，与同属华南型的滇南小耳猪和香猪的遗传关系较远，与属于华中型的大花白猪、宁乡猪的遗传关系较近，此项研究填补了陆川猪起源分化
的空白。彭红元等(2012对来自陆川猪原产地陆川县及其周边县市6个种猪养殖场的陆川猪共74个个体的种群遗传多样性进行研究，同样也发现与属于华中型的大花白猪、宁乡猪的遗传关系较近，此项研究为了解陆川猪的种质资源及中国地方品种猪资源保护和利用提供了分子生物学的科学理论依据。秦小娥等(2011a采用组织块培养法成功获得陆川猪耳部成纤维细胞，发现细胞生长时呈放射状、旋涡状或火焰状走势，绝大部分呈不规则三角形或梭形，此项研究为后续体细胞核移植、转基因技术的研究奠定基础。秦小娥等(2011b用低浓度的甲基转移酶抑制剂5-Aza-dC(0.01μmol/L联合去乙酰基转移酶抑制剂TSA(0.05μmol/L连续处理广西陆川猪体细胞和重构胚，结果发现能提高猪克隆胚的发育能力，这为提高陆川猪体细胞克隆效率奠定基础。覃兆鲜等(2011成功构建猪抗黏液病毒基因(myxo-virusresistance1，Mx1表达载体并转染到陆川猪的胎儿成纤维细胞，以建立转猪Mx1基因的陆川猪胎儿成纤维细胞系，为下一步开展广西地方猪的转基因育种奠定基础。
1.2.2猪支原体肺炎病原分子致病机制陆川猪具有较高的抗病力，唯独易患猪支原体肺炎(mycoplasmalpneumoniaofswine，MPS。李超等(2012研究发现，MPS是由猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumonias，Mhp引起的一种以对称性胰腺样病变或肺叶肉样病变为特征的猪特有的接触性传染病，临床主要症状为气喘，因此也俗称猪喘气病，特点为高发病率、高度传染性和较低死亡率。导致陆川猪呼吸道疾病综合征的原因在于其呼吸系统特点：陆川猪后颈短而粗，气管和支气管较短小，背腰宽广凹下，腹大常拖地，易长膘的体型使胸腔较窄小，因此使得陆川猪可能较易感染MPS，此传染病的暴发严重危害陆川猪养殖业的可持续健康发展，并造成无法估量的经济损失(赵德明等，2008；李莹莹等，2013。因此，为了能有效防控陆川猪MPS，除了加大Mhp感染的检测力度外，更重要的是还应加强其病原分子致病机制等基础研究，如对能编码Mhp细胞表面46ku蛋白抗
原、引起早期免疫应答反应且具有种特异性的表面脂蛋白P46基因(Okada等，2005进行研究。李莹莹等(2014采集了2011—2013年广西陆川猪疑似MPS阳性病料作为试验材料，利用分子克隆技术成功获得4株Mhp毒株，命名为GXLC1、GXLC2、GXLC3、GXLC4，并用生物信息学分析软件对P46基因序列进行分析，结果发现P46