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精原干细胞的分离、纯化和初步鉴定薛振华1刘国世1,2史建民1王梁1田秀芝1王永彬1侯保民3田见晖1,2曾申明1,2朱士恩1,2(1.中国农业大学动物科学技术学院,北京100094;2.农业生物技术国家重点实验室,北京100094;3.内蒙古兴安盟科右中旗草原工作站,内蒙古巴彦胡舒029400)摘要对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定。对8d达兰仔猪的睾丸实质组织,采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞,制备单细胞悬液,用Percoll不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%梯度法纯化精原细胞;对纯化后的细胞培养12h,细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP染色鉴定,初步确定精原干细胞及其比例。结果表明:所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为>>>>9265%和>>>>735%,平均每克睾丸可获得>>>>417×107个细胞;精原细胞主要62%,精原干细胞占该分布于19%~27%的Percoll梯度带中,经纯化后其纯度为>>>>47带细胞的比例为>>>>552%。因此,采用组合酶消化,结合Percoll不连续密度梯度离心法分离的达兰仔猪的精原细胞不但能够满足体外培养的需要,还可以做为精原干细胞移植的研究材料。关键词达兰猪;精原干细胞;分离;纯化;精原细胞DA-6对草莓叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响
单守明1刘国杰1李绍华2苗鹏飞1(>>>>1中国农业大学农学与生物技术学院,北京100094;>>>>2中国科学院北京植物研究所,北京100093)摘要以草莓为试材,研究叶面喷施二烷氨基乙醇羧酸酯(DA-6)对叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响。结果表明,处理14d后,10和20mg/LDA-6分别使草莓叶片净光合速率提高了7.6%和16.4%,同时还提高了叶绿素含量、叶绿体Hill反应、光合磷酸化活性和>>>>Mg2+ATPase活性,并使Rubisco活性各提高了7.9%和16.9%。40mg/L的DA-6降低了叶片的光合作用速率、叶绿素含量、叶绿体光化学反应和Rubisco活性。试验结果表明,叶面喷施DA-6能调节草莓叶片叶绿体光化学反应和Rubisco活性,并同时影响叶片的净光合作用速率。